廠家直供人腫瘤壞死因子-α（TNF-α）ELISA KIT-中國PLC網

廠家直供人腫瘤壞死因子-α（TNF-α）ELISA KIT

	價格：198000 元(人民幣)	產地：本地
	最少起訂量：1	發貨地：本地至全國
	上架時間：2019-11-08 11:37:15	瀏覽量：79
	上海朗頓生物科技有限公司
	經營模式：其他	公司類型：生產加工
	所屬行業：綜合	主要客戶：全國
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詳細介紹

人腫瘤壞死因子-α（TNF-α）酶聯免疫檢測
人腫瘤壞死因子-α（TNF-α）ELISA KIT用途：用于人血清、血漿及相關液體樣本中腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的測定。

人腫瘤壞死因子-α（TNF-α）ELISA KIT工作原理
本試劑盒采用的是生物素雙抗體夾心酶聯免疫吸附法（ELISA）測定樣品中人腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的水平。
向預先包被了人腫瘤壞死因子-α（TNF-α）單克隆抗體的酶標孔中加入腫瘤壞死因子-α（TNF-α），溫育；溫育后，加入生物素標記的抗TNF-Α抗體，再與鏈霉親和素-HRP結合，形成免疫復合物，再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶，然后加入底物A、B，產生藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。
顏色的深淺與樣品中人腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的濃度呈正相關。

試劑盒組成
1?標準品（960ng/L）?0.5ml?7?顯色劑A液?3ml
2?標準品稀釋液?3ml?8?顯色劑B液?3ml
3?酶標包被板?12孔×4條?9?終止液?3ml
4?鏈霉親和素-HRP?3ml?10?說明書?1份
5?20倍濃縮洗滌液?20ml?11?封板膜?2張
6?生物素標記的抗- TNF-Α抗體?1ml?12?密封袋?1個
需要而未提供的試劑和器材
1．?37℃恒溫箱。

2．?標準規格酶標儀。

3．?精密移液器及一次性吸頭
4．?蒸餾水，
5．?一次性試管
6．?吸水紙
注意事項
1．?從2-8℃取出的試劑盒，在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。
酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2．?各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。

3．?嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。

4．?為避免交叉污染，要避免重復使用手中的吸頭和封板膜。

5．?不用的其它試劑應包裝好或蓋好。
不同批號的試劑不要混用。
保質前使用。

6．?底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。

洗板方法
手工洗板方法：甩掉酶標板內的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次；將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內，浸泡1-2分鐘。
根據需要，重復此過程數次。

自動洗板：如果有自動洗板機，應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

標本要求
1．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

2．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。
若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
操作程序
1．?標準品的稀釋：（本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶請按照說明自行在小試管中倍比稀釋）：
480ng/L?（5號標準品）?120μl的原倍標準品加入120μl的標準品稀釋液
240ng/L?（4號標準品）?120μl的5號標準品加入120μl的標準品稀釋液
120ng/L?（3號標準品）?120μl的4號標準品加入120μl的標準品稀釋液
60ng/L?（2號標準品）?120μl的3號標準品加入120μl的標準品稀釋液
30ng/L?（1號標準品）?120μl的2號標準品加入120μl的標準品稀釋液
2．?根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。
每個標準品和空白孔建議做復孔。
每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。

3．?加樣：1）空白孔：空白對照孔不加樣品，生物素標記的抗IGFBP-3抗體，鏈霉親和素-HRP，其余各步操作相同；2）標準品孔:加入標準品50μl，鏈霉親和素-HRP50μl（標準品中已事先整合好生物素標記抗體，故在操作時不加，只加鏈霉素-HRP）；3）樣本反應孔：加入樣本40μl，然后各加入抗- TNF-Α抗體10μl、鏈霉親和素-HRP（空白孔除外）50μl。
蓋上封板膜，輕輕振蕩混勻，37℃溫育60分鐘。

4．?配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。

5．?洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6．?顯色：每孔先加入顯色劑A 50μl，再加入顯色劑B 50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘。

7．?終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

8．?測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。
測定應在加終止液后10分鐘以內進行。

9.根據標準品的濃度及對應的OD值計算出標準曲線的直線回歸方程，再根據樣品的OD值在回歸方程上計算出對應的樣品濃度。
也可以使用各種應用軟件來計算。

操作程序總結：
準備試劑，樣品和標準品

加入準備好的樣品和標準品，生物素標記二抗和酶標試劑，37℃反應60分鐘

洗板5次，加入顯色液A、B，37℃顯色10分鐘

加入終止液

10分鐘之內讀OD值

計算

檢測范圍：3ng/L→900ng/L。

規格：??? 48T/盒
保存：??? 2-8℃
有效期：? 6個月（2-8℃）。

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腫瘤壞死因子α,TNFα,ELISA

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