廠家直供植物二胺氧化酶(DAO)ELISA KIT-中國PLC網

廠家直供植物二胺氧化酶(DAO)ELISA KIT

	價格：198000 元(人民幣)	產地：本地
	最少起訂量：1	發貨地：本地至全國
	上架時間：2019-11-08 11:37:13	瀏覽量：40
	上海朗頓生物科技有限公司
	經營模式：其他	公司類型：生產加工
	所屬行業：綜合	主要客戶：全國
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詳細介紹

植物二胺氧化酶(DAO)ELISA KIT 目的：本試劑盒用于測定植物組織，細胞及相關液體樣本中二胺氧化酶(DAO)的含量。

植物二胺氧化酶(DAO)ELISA KIT實驗原理：
? 本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中植物二胺氧化酶(DAO)水平。
用純化的植物二胺氧化酶(DAO)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入二胺氧化酶(DAO)，再與HRP標記的二胺氧化酶(DAO)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。
TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。
顏色的深淺和樣品中的二胺氧化酶(DAO)呈正相關。
用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中植物二胺氧化酶(DAO)濃度。

植物二胺氧化酶(DAO)ELISA KIT試劑盒組成：
試劑盒組成?48孔配置?96孔配置?保存
說明書?1份?1份?
封板膜?2片（48）?2片（96）?
密封袋?1個?1個?
酶標包被板?1×48?1×96?2-8℃保存
標準品：45ng/ml?0.5ml×1瓶?0.5ml×1瓶?2-8℃保存
標準品稀釋液?1.5ml×1瓶?1.5ml×1瓶?2-8℃保存
酶標試劑?3 ml×1瓶?6 ml×1瓶?2-8℃保存
樣品稀釋液?3 ml×1瓶?6 ml×1瓶?2-8℃保存
顯色劑A液?3 ml×1瓶?6 ml×1瓶?2-8℃保存
顯色劑B液?3 ml×1瓶?6 ml×1瓶?2-8℃保存
終止液?3ml×1瓶?6ml×1瓶?2-8℃保存
濃縮洗滌液?（20ml×20倍）×1瓶?（20ml×30倍）×1瓶?2-8℃保存

植物二胺氧化酶(DAO)ELISA KIT樣本處理及要求：
1 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。
若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.
2 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟
1.?標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在第一、第二孔中分別加標準品100μl，然后在第一、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從第一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。
（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為30ng/ml，20ng/ml，10ng/ml，5ng/ml，2.5ng/ml）。

2.?加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。
在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。
加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3.?溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.?配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5.?洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6.?加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7.?溫育：操作同3。

8.?洗滌：操作同5。

9.?顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10.?終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

11.?測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。
測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

注意事項：
1．?試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2．?濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

3．?各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。
一次加樣時間最好控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

4．?請每次測定的同時做標準曲線，最好做復孔。
如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請最后乘以總稀釋倍數（×n×5）。

5．?封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．?底物請避光保存。

7．?嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8．?所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9．?本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

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計算：
以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，???
在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD?????
值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋?????
倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標?????
準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值?????
代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋?????
倍數，即為樣品的實際濃度。
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（此圖僅供參考）

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試劑盒性能：
1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.92以上。

2.批內與批見應分別小于9%和15%

檢測范圍：?????????????????????????????????????????????
0.5ng/ml -30ng/ml????????????????????????????????????
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保存條件及有效期：
1.試劑盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6個月
二胺氧化酶,DAO,ELISA

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