傳遞窗驗證方案
（最全整理版）

目錄
Contents

1    簡介...

2    實施計劃...

3    驗證小組成員... 4

4    儀器及用具... 4

5    菌株和培養基... 5

6    安裝確認... 5

7    運行確認... 5

8    性能確認... 6

9    再驗證... 8

10   修改事項... 8

11   相關SOP. 8

12   附件... 8

1          簡介

傳遞窗是一種潔凈室的輔助設備，主要用于潔凈區與潔凈區之間，潔凈區與非潔凈區之間小件物品的傳遞，以減少潔凈室的開門次數，使潔凈室的污染降低到最低程度。傳遞窗內安裝有紫外燈，物品經紫外線照射消毒后進入潔凈區。紫外線是一種電磁輻射，波長190～350nm，其中以253.7nm的殺菌力最強，可使DNA鏈上相鄰嘧啶堿基之間形成二聚體，抑制DNA的復制，導致突變或死亡。紫外線的殺菌力與紫外線強度、照射時間、溫度和濕度等因素有關。

本方案包括該設備的安裝確認、運行確認和性能確認等內容。在確認過程中出現任何偏差，必須及時解決偏差之后再進行下一步的確認。

2          實施計劃

3          驗證小組成員

4        儀器及用具

5        菌株和培養基

6        安裝確認

由供應商技術人員作為主要安裝人員，工程部人員協助安裝。安裝過程中對裝置及其工作狀態進行檢查。若確認過程中發現因為紫外燈管不符合要求而造成偏差，工程部人員負責紫外燈管的申購與更換。將安裝確認結果記錄于附件1和附件2。

7        運行確認

運行確認在安裝確認之后進行，若安裝確認出現偏差，須在解決偏差之后進行。通過對傳遞窗進行試運行，以證明設備各項技術參數和功能能達到本公司設定要求。將運行確認結果記錄于附件3和附件4。

7.1     SOP確認：確認是否有傳遞窗使用的SOP，作為傳遞窗使用操作的技術支持與指導。驗證全過程必須嚴格按照此SOP對傳遞窗進行操作。

7.2     設備操作功能確認：逐項確認各項操作功能，結果均應符合要求。

7.3     互鎖確認:兩側門設有互鎖裝置，確保兩側門不能同時處于開啟狀態。

7.4     輻照強度測定：開啟紫外燈5min后，用中心波長為253.7nm的紫外線強度測定儀

在燈管下方垂直中心操作面處測量其輻照度值（uW/cm²）。普通型或低臭氧型直管紫外燈，新燈管的輻照度值應為：功率10W，≥65uW/cm² ；功率15W，≥145 uW/cm² 。使用中的燈管其輻照度值：功率10W，≥45uW/cm² ；功率15W，≥100 uW/cm² ，低于此值者應予以更換。

7.5   紫外強度分布：開啟紫外燈5min后，在傳遞窗底部測量中央及四角5個位置的紫

外線強度（uW/cm²），確定紫外線強度最弱位置。以紫外線強度最弱位置達到所需照射劑量的時間作為消毒合格時間。

潔凈區

非潔凈區

8        性能確認

確認紫外燈對細菌及其芽孢和真菌的殺滅效果。性能確認在運行確認之后進行，若運行確認出現偏差，須在偏差解決之后進行。

8.1      培養基的制備

8.1.1     營養瓊脂培養基

配方：營養瓊脂培養基粉       31.0g

純化水                 1000ml

配制：稱取營養瓊脂培養基粉置適宜容器中，按配方比例加入純化水，水浴加熱使溶解，調pH至7.1±0.2，分裝于適宜容器，置高壓滅菌器滅菌121℃×15分鐘。

8.1.2     改良馬丁瓊脂培養基

配方：改良馬丁瓊脂培養基粉    42.0g

純化水                  1000ml

配制：稱取改良馬丁瓊脂培養基粉，按配方比例加入純化水，水浴加熱使溶解，調pH至6.4±0.2，分裝于適宜容器，置高壓滅菌器滅菌115℃×20分鐘。

8.1.3     營養肉湯培養基

配方：營養肉湯培養基    20g

純化水            1000ml

配制：稱取營養肉湯培養基20克，加1000ml純化水，加熱溶解，加熱至沸，冷卻至常溫，分裝于適宜容器，置高壓滅菌器滅菌121℃×15分鐘。

8.1.4      改良馬丁培養基

配方：改良馬丁培養基粉    28.0g

純化水              1000ml

配制：稱取改良馬丁培養基粉，按配方比例加入純化水，水浴加熱使溶解，調pH至6.4±0.2，分裝于適宜容器，置高壓滅菌器滅菌115℃×20分鐘。

8.2        菌懸液的制備

8.2.1     接種金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的新鮮培養物至營養肉湯培養基中,30～35℃培養18～24小時；接種白色念珠菌的新鮮培養物至改良馬丁培養基中,23～28℃培

養18～24小時。

8.1.1          細菌芽孢懸液的制備：

8.1.1.1    取枯草芽孢桿菌增菌液適量至營養瓊脂培養基斜面，使菌液布滿營養瓊脂培養基

斜面，30～35℃培養5～7天。用接種環取菌樣少許涂于玻片上，固定后以改良芽孢染色法染色，并在顯微鏡（油鏡）下進行鏡檢。當芽孢形成率達95％以上時，即可進行以下處理。否則，應在室溫下放置一定時間，直至達到上述芽孢形成率后再進行以下處理。

8.1.1.2    取適量無菌水于營養瓊脂培養基斜面，以L棒輕輕推刮下菌苔。吸出第一批洗下

的菌懸液，再取適量無菌水于營養瓊脂培養基斜面，重復洗菌一遍。將第一和第二批洗下的菌懸液集中于一含玻璃珠的無菌三角燒瓶內，振搖5min，打碎菌塊，使成均勻的芽孢懸液。

8.1.1.3    將芽孢液放于80℃水浴中10min（或60℃，30min），以殺滅殘余的細菌繁殖體。

待冷至室溫后，保存于4℃冰箱中備用。有效使用期為半年。

8.2     稀釋液

1％蛋白胨—PBS溶液：取磷酸二氫鉀1.36g、磷酸氫二鈉2.83g、蛋白胨10.0g，加水1000ml，微溫溶解，分裝，置高壓滅菌器121℃×30分鐘滅菌。

8.3     菌片的制備

8.3.1          試驗中使用的菌片是以菌液滴加于載體上制成（1.0cm×1.0cm的不銹鋼片）。所

用載體染菌前應進行脫脂處理。脫脂方法如下：①將載體放在含肥皂的水中煮沸30min；②純化水洗凈；③純化水煮沸10min；④用純化水漂洗至pH呈中性；⑤晾干備用。

8.3.2          載體經滅菌后使用滴染法染菌。將滅菌載體平放于滅菌平皿內，每個載體滴注

10ul菌懸液，用10ul移液器接滅菌塑料吸頭，滴染菌液，并用接種環涂勻整個載體表面。滴染菌液后，染菌載體可置超凈臺上晾干后使用。

8.3.3          每個菌片的染菌量即回收菌量應為1×10⁵～5×10⁶cfu/片。

8.4     載體定量消毒試驗

8.4.1          取4種菌染菌載片各4個。開啟紫外燈5min后，將16個染菌載片平放于無菌平

皿內，水平放于紫外線強度最弱的位置處照射，于4個不同間隔時間（15min、30 min、45 min、60min）各取出1個染菌玻片，分別投入4個盛有10ml稀釋液的試管中，用電動混勻器震蕩20s或振打80次，洗脫載片上的菌體。

8.4.2          取洗脫液或其稀釋液1ml，作平板傾注。細菌放30～35℃培養48小時做活菌計

數，真菌放23～28℃培養72小時做活菌計數。

8.4.3          陽性對照，除不做照射處理外，操作同上。

8.4.4  殺滅對數值計算

殺滅對數值（KL）＝對照組活菌濃度對數值-試驗組活菌濃度對數值

8.4.5     消毒合格時間

在照射強度最弱處，對細菌及其芽孢和真菌的殺滅對數值≥3所需的時間即為消毒合格時間。其它傳遞窗，確定最弱照射強度后，根據所需照射劑量確定消毒合格時間。

照射劑量（uW·s/cm² ）＝紫外線照射強度（uW/cm²）×時間（s）

將性能確認結果記錄于附件5。

9          再驗證

9.1     傳遞窗構造或紫外燈管安裝位置發生改變時，需進行再驗證。

9.2     若無任何改變或偏差時，每6個月對該系統進行紫外燈強度確認。

10  修改事項

在實施過程中，如果方案需要修改，必須提交書面報告，闡述修改的原因、修

改的內容，并經過相關部門及QA的認可。修改后的方案同先前執行的方案一起歸檔。

11      相關SOP

12      附件

方案結束。

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